A széklet vizsgálata. A helminták laboratóriumi diagnosztizálásának módszerei
A helminták három csoportja orvosi jelentőséggel bír - fonálférgek(gömbférgek) cestodes(galandféreg) és trematodes(bolyhos).
A helmintpeték fajok azonosításához a következő jellemzőket használjuk.
1. Méretek. Mérje meg a tojások hosszát és szélességét, amelyek általában minden fajhoz meghatározott méretűek.
2. A nyomtatvány. Minden fajnak megvan a maga sajátos tojásformája.
3. Fejlesztési szakasz, amikor hozzá van rendelve külső környezet . Egyes fajoknál a tojások egy sejtből állnak; másoknak több sejtje is lehet a tojásban; megint másoknál a peték általában embrionálisak (azaz lárvákat tartalmaznak), amikor a széklettel a külső környezetbe ürülnek. Esetenként, ha a székletmintákat néhány órával vagy 1-2 nappal a székletürítés után megvizsgálják, a helmintpeték felnőttkori állapotba fejlődnek. Ideális esetben csak friss székletmintákat kell elfogadni elemzésre.
4. A tojáshéj vastagsága. Egyes fajok tojásai, például az Ascaris, vastag héjúak; más típusú férgek esetében, például a horgosférgek esetében, a tojások héja vékony.
6. Elérhetőség morfológiai jellemzők például kupakok, tüskék, dugók, horgok vagy kopott külső héj.
Ha bélféreg tojást vagy ahhoz hasonló tárgyat találnak, a fenti jelek mindegyikét gondosan értékelni kell a konkrét diagnózis felállítása érdekében.
A helmintpeték faji azonosságának megállapításához meg kell határozni méretüket, alakjukat, fejlettségi fokukat, héjvastagságukat, színüket és a morfológiai jellemzők, például sapkák, tüskék, dugók, horgok és gumós külső héj jelenlétét. .
A konkrét diagnózis felállításához speciális determinánsokat és a helminth tojások sematikus ábrázolását használják.
Rizs. 34.2. A helminth tojások relatív mérete, alakja és szerkezete.
1. SZÉKLET VIZSGÁLATA.
Helmintológiai vizsgálatokat végeznek a helmintiázisok diagnosztizálására peték, lárvák, kifejlett helmintok vagy azok töredékeinek kimutatásával a kóros anyagban. Mivel a legtöbb féreg ivarérett fejlődési szakaszában van gyomor-bél traktus vagy a vele kommunikáló szervekben a széklet vizsgálatára leggyakrabban makro- és mikrohelmintoszkópos módszereket alkalmaznak (legfeljebb egy naposak).
A vizsgálat megbízhatóságának növelése érdekében az elemzéseket naponta többször meg kell ismételni 1-3 napos időközönként.
1.1. MAKRO SZÜKLETEK HELMINTOSZKÓPOS VIZSGÁLATA
Elszámolási módszer. A napi adag ürüléket alaposan lemossuk vízzel, amíg az üledék feletti víz kitisztul. A felső réteg lecsepegtetése után az üledéket Petri-csészébe helyezzük, és sötét háttér előtt nagyítóval vagy szabad szemmel nézzük.
Szűrési módszer. A vízzel kevert ürüléket egy speciális eszköz szitarendszerére helyezik. Csapvizes mosás után a szitákat megfordítjuk, és miután tartalmát Petri-csészékbe mossuk, szabad szemmel vagy nagyítóval megnézzük.
1.2. MIKRO HELMINTOSZKÓPOS TANULMÁNYOK
Helmintoovoszkópos és helmintolarvoszkopikus módszereket alkalmaznak a helmintpeték és lárváik kimutatására.
1.2.1. HELMINTOVOSZKÓPOS MÓDSZEREK
Helminto-ovoszkópos módszerekkel a helminták kimutatására először kétféle kenetet készítenek - anyanyelvi és vastag .
Þ Natív kenet. Kis mennyiségű ürüléket dörzsölünk egy tárgylemezre csepp 50%-os glicerinoldatban, ill. forralt víz. A nagy részecskéket óvatosan eltávolítjuk, a keveréket fedőlemezzel lefedjük, és mikroszkóp alatt megvizsgáljuk (két kenetet nézünk).
A natív kenet készítésekor tudnia kell, hogy gyenge invázió esetén a helminth tojások ritkán találhatók benne.
Þ Vastag kenet celofánnal Kato szerint. A módszer a bélféreg tojásainak kimutatásán alapul egy vastag, glicerinnel tisztított és malachitzöldre színezett székletkenetben. Az elkészített vastag ürülékkenetet nedves celofán glicerin-fenol keverékével megnedvesített celofándarabbal borítják. A gyógyszert 30-60 perc múlva vizsgálják, amikor enyhén kiszárad és kitisztul, aminek eredményeként kis nagyítású mikroszkóppal könnyen kimutathatók a helmintpeték.
Egy nagy kenetben jól láthatóak a színes nagy helminth tojások, és a törpe galandféreg átlátszó tojásai valamivel rosszabbak. Ez a módszer nem alkalmas kisméretű tojások kimutatására.
Þ Dúsítási módszerek
A dúsítási módszerek közül módszereket alkalmaznak lebegtetés (lebegő) és ülepedés (csapadék).
DE). Flotációs módszerek különböző telített oldatok felhasználásán alapul vegyi anyagok amelyben a tojások a fajsúlykülönbség miatt lebegnek.
Fülleborn lebegő módszere a bélféreg tojásainak telített oldatban való lebegtetésén alapul nátrium-klorid(fajsúlya 1,18), amely lehetővé teszi a kis számú tojás kimutatását. A módszer hatékonyabb, mint a natív kenet tanulmányozása. Előnye a rendelkezésre állás és az alacsony költség. Ez a módszer jól feltárja a fonálférgek és a törpe galandféreg tojásait.
Ebben az oldatban azonban nem lebegnek a trematoda peték, a taeniidák, a megtermékenyítetlen ascaris peték. Ezért nem csak a felületi filmet, hanem a lerakódást is meg kell vizsgálni, ami bonyolítja a módszert. A hátrányok közé tartozik a peték késleltetett kelése: a törpe galandféreg petéi 15-20 perc, az ascaris - 1,5-2 óra, az ostorféreg - 2-3 óra múlva kelnek ki.
Módszer E.V.Kalantaryan dúsítási módszer is, de hatékonyabb és egyszerűbb. 1,38 relatív sűrűségű telített nátrium-nitrát oldatot használunk. Ezért a legtöbb féreg tojásai a felszínre úsznak, és a felszíni filmben találhatók, üledékvizsgálat nem szükséges.
A módszer hátránya a nátrium-nitrát hiánya, valamint az, hogy a trematoda peték, taeniid onkoszférák nem úsznak fel és maradnak az üledékben.
B). Az ülepítés módja (ülepedés) A helminth tojások olyan vegyszerek használatán alapulnak, amelyek feloldják a zsírokat és a fehérjéket a székletben.
P. P. Goryachev módszere peteülepedés elve alapján. A kenet ebben az esetben könnyű, ami megkönnyíti a kis trematode tojások kimutatását.
Gorjacsov módszerét javasolták a tojások kimutatására opisthorchiaés hatékonyabbnak bizonyult, mint a natív kenet és a Fülleborn-módszer vizsgálata. Jelenleg az opisthorchiasis (clonorchiasis) diagnosztizálására Kato és Kalantaryan módszerei javasoltak, mivel ezek meglehetősen hatékonyak és technikailag egyszerűbbek.
1.2.2. HELMINTHOLARVOSZKÓPIÁS MÓDSZEREK (lárvák kimutatása)
Csavarási módszer E.S. Shulman szerint. A módszert elsősorban bélféreg lárvák székletben történő kimutatására javasolták strongiloidok. Csak a frissen ürített ürüléket vizsgáljuk, amit 5-szörös vízmennyiségben bottal keverünk. A keverés megkezdése után 20-30 másodperccel a pálcát gyorsan eltávolítjuk, a végén keletkezett folyadékcseppet tárgylemezre visszük és mikroszkóppal átvisszük.
Bermann módszer a helminth lárvák meleg felé vándorló képességén alapul, és a székletben való kimutatására szolgál, elsősorban strongyloidiasis gyanúja esetén.
2. MÓDSZEREK EGYÉB VIZSGÁLATOK ÉS TITKOK TANULMÁNYOZÁSÁRA
A nyombéltartalomban a pelyheket és a benne lévő sűrű zárványokat mikroszkóppal megvizsgáljuk, majd kémcsövekbe öntve azonos térfogatú kénes étert adunk hozzá, centrifugáljuk és megvizsgáljuk az üledéket.
A hányásban alkalmanként férgek vagy azok töredékei találhatók (például gennyesedés esetén echinococcus ciszta enyhe vizes vagy gennyes folyadék ürül ki a tüdőből a hörgőkbe hányással). A diagnózis a kutikuláris membrán töredékeinek, a scolexnek és az echinococcus horgainak kimutatása alapján történik.
Vizeletvizsgálat.
Az urogenitális schistosomiasis diagnosztizálása a tojások és a miracidiumok azonosításával történik. Az urogenitális schistosomiasis kórokozójának (Schistosoma haemotobium) tojásai nagyok és elérik a 120-150 mikron hosszúságot, egyik végén terminális tüske van. A tojás belsejében az embrió (miracidium) látható. Néha szükségessé válik annak megállapítása, hogy a talált peték életképesek-e. Ez akkor állapítható meg, ha a készítmény friss, és nem adtak hozzá tartósítószert. Nál nél krónikus forma schistosomiasis betegeknél a vizelés végére vér szabadul fel, de a petesejt ritkán található a vizeletben, ami miatt biopsziához kell folyamodni Hólyag.
A főként a tüdőben élő paragonimus peték vesében, húgyvezetékben, hólyagfalban történő lokalizáció esetén a vizeletbe kerülnek. A mikrofiláriák a chylous vizeletben találhatók.
Köpet vizsgálata.
A köpet tartalmazhat paragonimus petéket, schistoszómákat, vándorló fonálférgek lárváit, echinococcus hólyag töredékeit. Néhány helminthiasis esetén jellegzetes változások figyelhetők meg a köpetben. Nál nél paragonimiasis, például a köpetben sárgás csomók formájában petékcsoportok találhatók.
A mezőgazdasági és vadállatok bizonyos helmintiázisaival kapcsolatos terápiás és megelőző intézkedések végrehajtása előtt a betegség pontos diagnózisát időben kell elvégezni. A helmintiázisok diagnosztizálására két módszercsoport létezik - intravitális és postmortem. Ezenkívül meg kell tudni különböztetni a helmintiázist és más invazív, valamint fertőző betegségeket.
A helminthiasis intravitális diagnózisa
A helmintiázisok diagnózisa az állatok élete során a laboratóriumi kutatási módszerek és a diagnosztikai féregtelenítés (direkt módszerek), valamint immunbiológiai reakciók (közvetett módszerek) eredményei alapján történik. A helmintiázisok diagnosztizálásában kisegítő szerepet játszanak a köztes gazdaszervezetek (biohelminthiázisokkal) vizsgálataiból, klinikai és járványtani megfigyelésekből származó adatok. A fő diagnosztikai módszerek a laboratóriumi vizsgálatok, amelyek gyakran lehetővé teszik a helmintiázisok kórokozóinak vagy azok petéinek és lárváinak kimutatását ürülékben (széklet, vizelet, köpet), titkok (epe), szövetek (vér, izmok), szervek (bőrdarabok) ), a pontok és tályogok tartalmában.
Az állatok helmintiázisainak diagnosztizálására szolgáló laboratóriumi módszerek könnyen végrehajthatók és meglehetősen pontosak, ezért széles körben használják termelési körülmények között (állatorvosi laboratóriumokban és más állatorvosi intézményekben). A tervezett céltól függően a laboratóriumi vizsgálatok helminthoovoszkópos, helmintholarvoszkopikus és helminthoszkópos kutatási módszerekre oszthatók.
Helmintolarvoszkópos módszerek a kutatást a helminták lárváinak kimutatására használják (dictyocaul, mullerium stb.). Ebből a csoportból gyakran használják a széklet vizsgálatát Berman-Orlov és Vaid módszerei szerint.
Helmintoszkópia vagy makrohelmintoszkópia A vizsgálatokat diagnosztikai célokra használják a külsőleg felszabaduló helminták vagy azok töredékeinek (fészkek szegmenseinek) kimutatására. Gyakorlati körülmények között ez a módszer sertések ascariasisa, libák drepanidoteniasisa és más helminthiasis diagnózisát állítja fel.
Az állatokban előforduló helmintiázisok diagnosztizálásának laboratóriumi módszerei közül nagy gyakorlati jelentőséggel bírnak: a) helminthokoprológiai vizsgálatok (ürülék vizsgálata); b) más szervek váladékának vizsgálata; c) szövetkutatás.
Helmintokoprológiai vizsgálatok
Ugyanezen célokra egy speciális eszközt javasolnak, amely acél ágakból, átmeneti ágakból és az ágakhoz kapcsolódó két félgömb alakú felületből áll. Az ürülék eltávolítása az állatok végbéléből ezzel az eszközzel megkönnyíti az állatorvosok munkáját, és növeli ennek a manipulációnak a termelési kultúráját.
Nyulaknál több golyónyi ürüléket távolítanak el a végbélben a hasfal megnyomásával. Néha elfogadható a padlóról ürülékmintát venni, ha az friss és ismert, hogy melyik állattól. Egy állatból legalább 10-20 g ürüléket vegyen be. A madarak, prémes állatok, kutyák, macskák és vadon élő ragadozók (állatkertekben) ürülékét a ketrecek tiszta padlójáról gyűjtik (csoportos minták).
Minden székletminta fel van címkézve: a zacskó vagy a papírlap szélén (ahol nem érintkezik az ürülékkel) egyszerű ceruzávalírja be a minta számát (néha a tehenek nevét). Az ürülékmintákhoz leltárt csatolunk, mely tartalmazza a telep nevét, brigádjait, faját, az állatok nemét és korát (felnőtteknél - becenév vagy leltári szám), valamint a mintavétel időpontját. A mellékelt megjegyzésben kívánatos feltüntetni a székletvizsgálatok célját (például az elvégzett féregtelenítés ellenőrzését). Törekedni kell arra, hogy a székletmintákat gyorsan eljuttassák az állatorvosi laboratóriumba, és haladéktalanul kivizsgálják azokat, mert szobahőmérsékleten, 16-20 óra elteltével lárvák bújnak ki a bélszondák tojásaiból, ami megnehezíti a diktiokaulózis és a protostrongylidosis diagnosztizálását, valamint egyéb helminthiasisok.
Ha a székletmintákat nem vizsgálják a felvétel napján, akkor azokat hűtőszekrénybe vagy pincébe helyezik, legfeljebb 10 ° C-on. Fertőtlenítőszerek ne akadályozza meg a lárvák fejlődését a helminták tojásaiban. A széklet vizsgálatának eredményeit egy speciális naplóban rögzítik.
Berendezés helminthokoprológiai kutatáshoz. A helmintokoprológiai vizsgálatok megbízhatósága nagymértékben függ a laboratóriumi berendezések minőségétől. 1968-ban Ukrajnában standard berendezést fejlesztettek ki a helmintiázisok székletének tömeges vizsgálatára. Főleg ütésálló polisztirolból készült tárgyakból áll, két színben, amelyek könnyen tisztíthatók és semlegesíthetők (tűrik a forrást), valamint könnyen szállíthatók. A készlet különféle űrtartalmú csészéket, tölcséreket, kúpos kémcsöveket, szűrőket tartalmaz különböző méretű, öt rudas állvány (egyenként hat tölcsérhez), küvetta (az állvány méretétől függően), edények tárolására szolgáló dobozok, valamint gumikörte, üvegrudak és fémhurkok (1. ábra).
A korábban eltérő berendezésekkel ellentétben az új készlet javítja a hatékonyságot laboratóriumi kutatás az állatorvosok székletét és munkatermelékenységét, szélesebb körű kvantitatív helmintokoprológiai vizsgálatokat tesz lehetővé standardizált módszerekkel (féregtelenítés ellenőrzése), valamint javítja a munka esztétikai oldalát.
Különbséget kell tenni a széklet kutatásának kvalitatív és kvantitatív módszerei között.
Kvalitatív helmintokoprológiai vizsgálatok
A kvalitatív kutatási módszerek lehetővé teszik annak megállapítását, hogy az állatok mely helmintákkal fertőzöttek.
Helmintoovoszkópos módszerek. A helminthiasisok élethosszig tartó diagnosztizálására számos helmintho-ovoscopy módszert javasoltak, amelyek közül csak azokat vesszük figyelembe, amelyeket gyakrabban használnak az állatorvosi gyakorlatban.
A legtöbb helmintokoprológiai diagnosztikai módszer egyrészt a peték, a féreglárvák vagy azok töredékeinek fajsúlyának, másrészt a székletet lebegő folyadéknak a fajsúlyának különbségén alapul. Ezen komponensek fajsúlyának arányától függően flotációs, ülepítési és kombinált módszereket különböztetünk meg.
flotációs módszerek. Flotációs (lebegő) módszerekkel olyan folyadékokat (telített sóoldatokat) használnak, amelyek fajsúlya nagyobb, mint a helminth tojások tömege. A laboratóriumi gyakorlatban a legszélesebb körben használt telített oldat asztali só(fajsúlya 1,18). Egy ilyen oldat elkészítéséhez a nátrium-kloridot fokozatosan hozzáadjuk egy fazék forrásban lévő vízhez keverés közben, amíg kis csapadék képződik az alján (1 liter vízhez körülbelül 400 g nátrium-kloridot veszünk). A forró oldatot több réteg gézen vagy vattán keresztül üvegbe szűrjük, és lehűlés után felhasználjuk (kristályos csapadék képződik a palack alján).
Ritkábban az állatorvosi laboratóriumok telített magnézium-szulfát-oldatokat használnak 1,35 fajsúlyú (920 g/1 liter forró víz), nátrium-hiposzulfit pedig 1,37-1,41 fajsúlyú, hőmérséklettől függően. környezet(1750 g / 1 liter forró víz) és nátrium-nitrát 1,4 fajsúlyú (a só és a forró víz aránya 1: 1).
Fülleborn módszer Könnyű kivitelezés és nagy hatékonyság jellemzi a legtöbb nematódában és az állatok cestodosisában, így az első helyen áll a többi helmintokoprológiai diagnosztikai módszer között. 3-5 g ürüléket 50-100 ml-es üveg-, polisztirol- vagy műanyagpohárba helyezünk, és üvegrúddal való keverés közben fokozatosan hozzáadunk telített konyhasó-oldatot (nátrium-klorid) 15-20 rész flotációs folyadék egy rész székletre. A sűrű bárányürüléket először kis mennyiségű sóoldattal porcelánmozsárban őrölhetjük, majd a szuszpenziót egy pohárba öntjük, hozzáadva szükséges mennyiség nátrium-klorid oldat. A felúszott nagy részecskéket rúddal azonnal eltávolítjuk, az ürülék szuszpenzióját pedig egy másik pohárba célszerű szitán átszűrni (néha tejszűrőt használnak). A feltöltött minta 45-60 perces ülepítése után a felületi film három cseppjét fémhurokkal eltávolítjuk, tárgylemezre helyezzük, és fedőlemez nélkül mikroszkóppal vizsgáljuk. Minden vizsgálat után a hurkokat egy pohár vízben lemossák (ahelyett, hogy néhány kézikönyvben ajánlott alkohollámpán égetnék meg).
Kalantaryan módszer- Módosított Fülleborn-módszer. Flotációs folyadékként telített nátrium-nitrát oldatot használnak. A szuszpenzió ülepedési ideje 15-30 perc. Diagnózisra és acanthocephalosisra használják.
Lerakási módszerek. Az ülepítési módszerek a tojásnál kisebb fajsúlyú folyadékokat használnak.
Szekvenciális mosási módszer. Kis mennyiségű ürüléket (5 g) egy pohárban 10-szeres mennyiségű vízzel elkeverünk. Az elegyet egy nagy pohárba szűrjük, vizet adunk hozzá, majd a szűrletet 5 percig ülepítjük. Ezután a felső folyadékréteget le kell engedni vagy fecskendővel leszívni az üledékig; ugyanannyi vizet adunk a csapadékhoz, összekeverjük és ismét 5 percig ülepítjük. Ezeket a manipulációkat addig ismételjük, amíg az üvegben lévő folyadék felső rétege átlátszóvá nem válik. A folyadékot utoljára lecsepegtetjük, a csapadékot üvegre vagy bakteriológiai edénybe helyezzük és mikroszkóp alatt megvizsgáljuk. Ezt a módszert gyakran használják a legtöbb trematoda és acanthocephalosis diagnosztizálására.
Gorshkov módszer az ülepedés elvén alapul, amelyet a helmintpeték koncentrálása követ. Fémszitára vagy gézre 150-300 g lóürüléket helyezünk egy nagy, 15-20 cm átmérőjű üvegtölcsérbe a felső részébe, melyre 10-15 cm hosszú gumicsövet helyezünk, a végén kapcsos. a tölcsér alsó vége. Az ürüléket fellazítják és a tetejére öntik meleg víz. A tölcsérben lévő ürüléket 4 órától egy napig tartják, majd óvatosan kinyitják a bilincset, a folyadék egy részét centrifugacsövekbe engedik, és 3 percig centrifugálják. Ezután a folyadékot lecsepegtetjük, és a csapadékot mikroszkóp alatt megvizsgáljuk. Ezt a módszert a lovak draszciózisának és habronematózisának diagnosztizálására használják.
Kombinált módszerek. A helmintpeték ülepedésének és flotációjának elvén alapulnak, ezért hatékonyabbak a korábbi kutatási módszerekhez képest. Összetettségük miatt ezek a módszerek viszonylag korlátozottan alkalmazhatók ipari körülmények között.
Drága módszer. Kis mennyiségű ürüléket (3-5 g) egy pohárban 20-30 ml vízzel elkeverünk, a keveréket centrifugacsövekbe szűrjük és 1-2 percig centrifugáljuk, majd a felső folyadékréteget lecsepegtetjük, és egyenlő arányban glicerint és nátrium-kloridot adunk az üledékhez. A csövekben lévő keveréket összerázzuk és másodszor is centrifugáljuk. A felszínre úszott tojásokat a szuszpenziós filmmel együtt dróthurokkal eltávolítjuk, tárgylemezen lerázzuk, és mikroszkóppal lerázzuk. Glicerin hiányában a széklet telített sóoldattal keverhető a másodlagos centrifugálás előtt.
Shcherbovich módszere. A széklet vizsgálatának technikája hasonló az előző módszerhez. Abban különbözik ettől, hogy a másodlagos centrifugálás előtt telített nátrium-hiposzulfit-oldatot (sertések makrakanthorhynchosisával) vagy magnézium-szulfátot () adnak az üledékhez. A Darling módszerhez képest ez a módszer hatékonyabb.
Demidov flotációs-ülepítési módszere fascioliasis, valamint kérődzők egyéb trematodosisainak diagnosztizálására ajánlott. Egy ürülékmintát (3 g juhból és 5 g szarvasmarhából) egy 200 ml-es pohárba helyezünk, és telített konyhasó-oldatot öntünk a tetejére, és üvegrúddal alaposan összekeverjük, majd a szuszpenziót 15-20 percig ülepítjük. A felszínre úszott durva részecskéket papírkanállal eltávolítják, a felülúszó folyadékot pedig fecskendővel szívják le (a vizsgálatban egy nagy szám minták, a folyadék leengedhető), 20-30 ml üledék marad az alján. Adjon vizet az üledékhez az üveg teljes térfogatáig, és alaposan keverje össze. Az elegyet gézen vagy fémszitán át egy közönséges üvegbe szűrjük, és 5 percig ülepítjük. A felülúszó folyadékot leszívjuk, az alján 15-20 ml üledék marad, amit egy kúpos csészébe töltünk, közönséges pohárral leöblítjük és a mosófolyadékot egy kicsibe öntjük. A szuszpenziót kúpos csészében 3-5 percig ülepítjük, majd a folyadékot leszívjuk (ezt az eljárást megismételjük). A megtisztított csapadékot tárgylemezre visszük és mikroszkóppal vizsgáljuk. Ez a módszer hatékonyabb, mint a módszer egymást követő mosás.
Helmintolarvoszkópos módszerek. Berman-Orlov módszer. Az ürülék vizsgálatához egy készüléket használnak, amely egy közepes tölcsérből (műanyag, polisztirol vagy üveg), egy gumicsőből (10-15 cm hosszú), amelyet a felső vége a tölcsérrel köt össze, egy bilincs az alsó végéhez van rögzítve. a gumicsőből egy fémszitát vagy egy gézdarabot és egy állványt (egy vagy több eszközhöz). A felszerelt készüléket meleg vízzel (35-38 °) töltik fel. 10-15 g friss ürüléket szitára helyezünk, vagy gézbe csomagoljuk, és óvatosan tölcsérbe engedjük. A juhok ürülékét 2-4 órán át, a borjak ürülékét legalább 6-7 órán át a készülékben tartják. Ezután a cső bilincsét meglazítjuk, az átfolyó folyadékot kémcsőbe gyűjtjük és 2-3 percig centrifugáljuk. Ezt követően a felső folyadékréteget a cső gyors billentésével leeresztik, az alján maradó folyadékot tárgylemezre visszük, és mikroszkóp alatt megvizsgálják. A Berman készülékben a gumicsövön lévő bilincsek használata kényelmetlenséggel jár, ezért sok állatorvosi laboratóriumban a gumicsövek alsó végei közvetlenül kisméretű kémcsövekhez kapcsolódnak. Az üledék mikroszkóp alatti vizsgálata előtt a folyadékot nem centrifugálják.
A kérődzők ürüléke (különösen expedíciós körülmények között) a helmintholarvoscopy egyszerűsített módszerével (tölcsérek használata nélkül) vizsgálható tüdőfonálférgekre. Erre a célra kis, félkúpos csészéket (50 ml) használnak. A székletmintákat szűrőkre helyezik, vagy gézbe csomagolják, és csésze vízbe engedik. Néhány óra múlva a székletet eltávolítják, a csészéből a folyadékot leszívják vagy lecsepegtetik, és az üledéket mikroszkóposan megvizsgálják.
Wayda módszere. A kiskérődzőkből származó több ürülékgolyót egy bakteriológiai edénybe vagy rá helyezzük óraüvegés hidratálja őket egy kevés meleg víz. 10-20 perc elteltével a székletet eltávolítjuk, a maradék folyadékot pedig kis nagyítású mikroszkóp alatt megvizsgáljuk. Ennek a módszernek a hatékonysága jóval alacsonyabb az előző módszerhez képest, ezért ritkábban alkalmazzák juhok diktiokaulózisának és protostrongylidózisának diagnosztizálására.
Módszer megkülönböztető diagnózis invazív lárvák strongilátozzák. A legtöbb intestinalis strongylatosis kórokozói közel azonos tojásszerkezettel rendelkeznek, ezért helmintoszkópiával csak csoportdiagnózis állítható fel (például strongilatózisok).
A pontosabb (általános) diagnózis felállítása érdekében az állatorvosi laboratóriumokban néha invazív strongilát lárvák tenyészetét készítik. Körülbelül 5 g ürüléket helyezünk egy bakteriológiai csészébe, zárjuk le fedéllel, és termosztátba helyezzük 25-30 ° -os hőmérsékleten egy hétig. Ezután a lárvákkal ellátott ürüléket a Berman-Orlov módszerrel (az invazív lárvák székletből történő izolálására) megvizsgálják.
Fertőző lárvák különböző fajták az intestinalis strongilátok különböznek a test méretében, a sapka farokvégének szerkezetében és a bélsejtek számában. Például az oesophagostoma lárvái nagyobbak (legfeljebb 1 mm hosszúak), a sapka fonalas farokvége hosszú, a bélben 20-32 sejt található; közepes hosszúságú (kb. 0,8 mm) hemonch lárvák, a kupak filiform farokvégével, a bélben 16 sejt található.
Az időszakos mosást és a széklet ülepítését addig ismételjük, amíg a felső réteg ki nem tisztul. A folyadék felső rétegét utoljára leeresztik, és az üledéket kis részletekben fekete-fehér aljú küvettákban vizsgálják. Az észlelt helmintákat csipesszel, boncolótűkkel és ecsettel gyűjtik össze, mikroszkóp alatt nézik meg, majd tartósító folyadékba helyezik. A kis fonálférgek azonosítása érdekében az üledéket 10-20-szoros nagyítású binokuláris vagy állványos nagyítóval részenként is megvizsgálják.
Kvantitatív helmintokoprológiai vizsgálatok
Szabványosított Fülleborn-módszer kevésbé pontos, mint a Stoll módszer, de egyszerű kivitelezése miatt széles körben alkalmazzák az állatorvosi gyakorlatban az állatok féregtelenítésének hatékonyságának ellenőrzésére. A végrehajtás technikája szerint a standardizált módszer hasonlít a kvalitatív helmintho-ovoscopos vizsgálatok más módszereire. Azonban számos jellemzője van, amelyek közül a legfontosabbak a következők: 1) a székletmintáknak egyenlőnek kell lenniük; 2) egy térfogatú edények; 3) az ürülék vizes szuszpenzióinak ülepedésének ideje azonos; 4) azonos átmérőjű hurkok, azonos számú csepp vizsgálata.
A standardizált Berman-Orlov módszerrel megbecsülhető a dictyocaulous és progostrongylidosis invázió intenzitása kérődzőkben. Az eredmények megbízhatósága a vizsgálatok számának és gyakoriságának növekedésével nő.
Más szervek váladékának vizsgálata
A kötőhártya-üregek tartalmának vizsgálatát szarvasmarhák thelaziosisának (kórokozó - Thelazia rhodesi) diagnosztizálására használják. Fecskendőből öblítse ki a kötőhártya üregeit vizes jódoldattal; az áramló folyadékot küvettába vagy vese alakú coxába gyűjtjük, és megvizsgáljuk a borjak jelenlétét. Ebben az esetben vizes oldat a jódnak gyógyító hatása is van.
A kloákából való kiáramlás tanulmányozása az élethosszig tartó diagnózis érdekében történik. A kiszökött nyálkát tárgylemezre helyezzük, és mikroszkóp alatt megvizsgáljuk a kórokozó petéinek kimutatása érdekében.
A fő diagnosztikai módszer a perianális redőkből származó kaparék vizsgálata. Egy spatula alakú rúddal vagy egyenlő arányú glicerin és víz keverékével megnedvesített gyufával kaparást készítünk a gát perianális redőiből és belső felület farokgyökér. A kaparást egy csepp glicerinben lévő, vízzel ellátott tárgylemezre visszük, fedőlemezzel lefedjük és mikroszkóppal lefedjük. Az oxiur peték kimutatása megerősíti a klinikai diagnózist.
A "nyári fekélyekből" származó bőrkaparék vizsgálata javasolt a diagnózis felállításához bőrforma drasciosis és habronematosis. A frissen fekélyes bőrfelületről kaparást veszünk, és egy csepp hígított sósavból(1:1000). Ezután a készítményt boncolt tűkkel felhasítjuk, fedőlemezzel lefedjük, és mikroszkóp alatt megvizsgáljuk, hogy lárvákat vagy habront találjunk.
Szövetkutatás
A szarvasmarhák bőrének vizsgálatát (Gnedina szerint) az onchocerciasis diagnosztizálására használják. A fenekén hasfal az állatban a műtéti terület előkészítése után egy 2 mm vastag kis bőrdarabot (kis zabszemcsékkel) kivágunk, és a sebet jódtinktúrával bekenjük. Egy állatorvosi laboratóriumban ezt a bőrdarabot sóoldatban lévő tárgylemezre helyezik, boncolt tűkkel hasítják, majd mindent egy centrifugacsőbe öntenek, és néhány órára termosztátba helyezik 37-38 ° -os hőmérsékleten. Ezután a bőrrostokat eltávolítják, a folyadékot centrifugálják, és az üledéket mikroszkóposan megvizsgálják a mobil mikroonchocerci kimutatása érdekében.
Az izomdarabok tanulmányozása gyakran posztumusz végezték. Néha biopsziás módszert alkalmaznak a trichinosis élethosszig tartó diagnosztizálására. út műtéti beavatkozás izomdarabot vágunk ki (például a fül külső izmaiból), amelyből kis részeket készítünk (kb. zabpehely méretű). Ez utóbbiakat a kompresszor alsó üvegére helyezzük, a felső üveggel lefedjük, és csavarokkal összehozzuk, amíg teljesen le nem laposodik. A metszeteket trichinelloszkóppal, kis nagyítású mikroszkóppal, vetítős trichinoszkóp vagy KT-3 vetítőkamera segítségével tekintik meg.
Diagnosztikai féregtelenítés
A diagnosztikai féregtelenítéshez több állatot kiválasztanak, izolálnak a populáció többi részétől, és féreghajtót adnak be terápiás dózisban. Ezekből az állatokból egy vagy két napon belül izolált ürüléket összegyűjtenek, és helmintoszkópiás vizsgálatnak vetik alá a betegség kórokozójának kimutatására. Termelési körülmények között gyakran végeznek diagnosztikus féregtelenítést a kérődzők moniesiosisának, a libák drepanidoteniosisának, a húsevő cestodosisnak, a sertés-ascariasisnak és a csirke-ascariasisnak az élethosszig tartó diagnosztizálására.
Immunológiai reakciók
Allergiás bőrreakciókat javasoltak juhok fascioliasisának, húsevők opisthorchiasisának és juhok moniesiosisának, juhok hemonchiasisának és diktiokaulózisának, szarvasmarhák és lovak onchocerciasisának, valamint sertések trichinosisának élethosszig tartó diagnosztizálására.
A szerológiai módszerek közül a scolexoprecipitáció reakcióját kell jelezni, amely lehetővé teszi a diagnózist. korai szakaszaiban echinococcosis és kicsapódási reakció élő Ascaris és Trichinella lárvák felhasználásával a megfelelő helmintiázisok azonosítására.
A helminták köztes gazdáinak tanulmányozása
Az állatok helmintológiai vizsgálatának eredményeit mindig ki kell egészíteni a köztes gazdaszervezetek helmintiázisaira vonatkozó vizsgálatok adataival. Lehetővé teszik a helmintológiai helyzet feltárását, a helmintiázisok megjelenésének előrejelzését. A helmintok köztes gazdái lehetnek puhatestűek (édesvízi és szárazföldi), rákfélék (küklopsz, daphnia, kétlábúak, vízi szamarak), földigiliszták, rovarok (legyek, szúnyogok, szúnyogok, szitakötők, hangyák, bogarak), talajatkák.
Epizootológiai jelentőségű az egyes köztes gazdafajok sűrűsége (mennyiségi összetétele). Minél magasabb, annál több lehetőség van az állatok helminthiasissal való feltöltésére. A szárazföldi köztes gazdák különböző helyeken találhatók (trágyakupacokban, karámokon, legelőkön stb.). vízi köztes gazdák be hatalmas szám pangó sekély víztestek partjai mentén, növények sűrűjében élnek. Ezeken a helyeken az állatok (főleg) gyakran helminthiasissal fertőzöttek.
A köztes gazdákat féreglárvák jelenlétére friss (lehetőleg élő) állapotban binokuláris nagyítóval vagy kis nagyítású mikroszkóppal kell megvizsgálni. A köztes gazdák testében a helminták lárvaállapota be van kapcsolva különböző szakaszaiban fejlődését, de a legszembetűnőbbek a fertőző lárvák. A kutatás eredményeként meghatározott féregtípusok lárvái által a köztes gazdaszervezetek inváziójának kiterjedtsége (százaléka) és intenzitása (száma) meghatározásra került.
Oribatida vagy páncélozott, kullancsok (legfeljebb 1 mm hosszúak). A talaj felső rétegeiben élnek. Ezek a monézia kérődzők és más helminták köztes gazdái. Lárvák kimutatására galandférgek(ciszticerroidok) először egy tárgylemezen vízcseppben (nagyító vezérlése mellett) egy oribatida kullancs héját részekre osztják, majd a készítményt fedőlemezzel lefedve mikroszkóppal. A monézia cysticercoidjai lekerekítettek (0,15-0,19 mm átmérőjűek), négy szívófejjel és egy farokfüggelékkel vannak felszerelve. Nagyon kényesek, ezért ne használja a kullancsok kompressziós tesztelésének módszerét.
A többi nemzetséghez tartozó giliszta (Criodrilus, Eophila) mocsaras, iszapos partú víztestekben él. A kacsák hystrichosis és porrocecosis kórokozóinak köztes gazdájaként vannak regisztrálva. A Histrihis lárva nagyon nagy (legfeljebb 3 cm hosszú), fehéres színű, áttetsző bőr féreg hullámos csík formájában. A porrocecum lárvái tízszer kisebbek, mint az előző lárvák (2,5-3 mm); ben találhatók véredény giliszták mikroszkóp alatti kompresszoros vizsgálatában.
Kétlábúak tanulmányozása. Az amfipodák elérik a 2 cm hosszúságot, tengeri és édesvízi tározókban élnek. A polimorfózis kórokozóinak köztes gazdájaként vannak regisztrálva. madarak streptocarosis és tetramerosis. Ezeknek a rákoknak a kompresszoros vizsgálata során lárvákat találnak. A polymorphus lárvái (acantellák) oválisak, narancssárgák, legfeljebb 1 mm hosszúak, makroszkóposan láthatóak.
Vízi szamarak tanulmányozása. A vízi szamarak 1-1,5 cm hosszúak, édesvízi tározókban élnek, és közbenső gazdái a madárfilicolosis kórokozójának. A kompresszoros vizsgálat egy fehér színű, ovális alakú, 0,7 mm hosszú lárvát (acanthellát) talál.
Felfedezhetsz más köztes gazdákat is (szúnyogok, szúnyok, legyek, szitakötők, bogarak, hangyák).
Fluoreszcens mikroszkóp
Lumineszcens mikroszkópos módszer (V. G. Evranova szerint) - új módszer helminthiasis diagnózisa. Lehetővé teszi az azonos típusú tojások megkülönböztetését különböző típusok bélférgek, valamint az életképes tojások és lárvák megkülönböztetése az elhullottaktól. Korábban a trematodák, cestodák és fonálférgek tojásait akridinnarancs és más fluorokróm oldatokkal kezelték. A fonálférgek életképes petékjei és lárvái nem vagy gyengén lumineszkálnak, míg az elhullottak fényesen világítanak, és narancssárga, sárgászöld vagy sárga színűek.
Lumineszcens mikroszkóppal meg lehet különböztetni a fő húsevő cestodák tojásait, a kórokozók és a csirkék heterokidózisának tojásait, amelyek, mint ismeretes, méretükben, alakjukban és színükben hasonló szerkezetűek, valamint megkülönböztethetőek az életképes, ill. elhalt coccidia oociszták.
A preparátumokat MUF-3 vagy ML-2 mikroszkóp alatt nézzük. A lumineszcens mikroszkópos technika viszonylag egyszerű, gyártási körülmények között (állatorvosi laboratóriumok) is alkalmazható.
Más tanulmányokból, amelyek másodlagos jelentőségűek a helminthiasis diagnózisának felállításában. rámutathatunk például a vér morfológiai összetételének tisztázására (az eozinofília miatt), a fehérjefrakció meghatározására.
A helminth tojások rövid leírása
A különböző osztályok képviselőinek tojásai méretben, színben, alakban, héjszerkezetben és belső tartalomban különböznek.
Trematode tojás. Gyakran ovális alakú, egyik rúdon fedéllel. A héj sima. Egyes fajoknál a héj szálakkal (folyamatokkal), gumókkal van felszerelve. A tojások színezése világosszürkétől barnáig (általában sárga).
Cestode tojás. Két típusa van: galandférgek és galandférgek. Lentensben trematode tojásokhoz hasonlítanak (ovális, fedővel). A galandférgek tojásai szerkezetükben élesen különböznek a többi osztályba tartozó helminták tojásaitól: gyakrabban közepes méretűek, lekerekítettek, szürke színű, érett (az embrión belül egy onkoszféra három pár embrionális horoggal).
Fonálférgek tojásai. Kupak hiányában különböznek a trematode tojásoktól; a cestodes tojásaiból - onkoszféra hiánya.
A fonálférgek tojásainak mérete, alakja, szerkezete és színe nagyon változatos. A külső héj sima, göröngyös, sejtes: a héjak vastagsága a vékonytól (strongilátokban) a vastagig (trichocephalokban) változik. A legtöbb fonálféregnél a tojások ovális alakúak, szimmetrikusak, némelyikben linderesek (húzásokkal). A legtöbb fonálféreg éretlen petéket bocsát ki a szegmentáció előtti szakaszban vagy több hasítási golyót, kisebb részük érett (a tojás belsejében lárva képződik).
Kaparó tojás. Oválisak, ellipszoidok és fusiform alakúak, közepes és nagy méretűek. A külső környezetbe kerülő peték belsejében egy lárva található - egy akantor tíz embrionális horoggal (érett).
Klinikai megfigyelések
epidemiológiai adatok
A haszonállatok számos helminthiasisának diagnosztizálásánál jelentős segítséget nyújtanak az epizootológiai adatok (specifikus betegségekre kedvezőtlen körülmények, évszak, beteg állatok életkora, legelők és vízforrások jellege, meteorológiai viszonyok stb.). Például egy tömeges megbetegedés a hasi vízkór jeleivel és a juhok elhullása egy esős nyár után ősszel, valamint a vizes területek legeltetésre való használata ad okot a gyanúra. éles forma fasciolosis. A kislibák betegsége nyáron emésztési zavar (hasmenés) jeleivel és idegrendszer(parézis) egy sekély, pangó tározón való legeltetés után, amelyet küklopszokkal bőségesen népesítenek be, ez az alapja a drepanidoteniosis feltételezett diagnózisának. A bárányok tavaszi elhullása (3-4 héttel a legeltetés megkezdése után) felveti a fiatal juhok moniesiózisos betegségének gyanúját. Figyelembe kell venni a háziállatok helminthiasisának zonális jellemzőit is, lehetőleg klinikai megfigyelésekkel kombinálva.
Leggyakrabban a helminták fertőzése szennyezett élelmiszerrel, vízzel és mosatlan kézzel történik.
Közvetlen és közvetett módszerek a helmintiázisok diagnosztizálására
A mai napig számos módszert fejlesztettek ki diagnosztika helminthiasisok, de mindegyik két nagy csoportra osztható: közvetlen és közvetett. A közvetlen diagnosztikai módszerek közé tartoznak azok a vizsgálatok, amelyek lehetővé teszik a helminták, azok töredékeinek, lárváinak vagy tojásainak közvetlen azonosítását. A helmintiázisok diagnosztizálásának közvetett módszerei a helminthiasis egy bizonyos fajtájára jellemző másodlagos változások azonosításán alapulnak.
A helminthiasis diagnosztizálásának legnépszerűbb közvetlen módszerei a makro- és mikrohelmintoszkópos kutatási módszerek.
Makrohelmintoszkópos kutatási módszerek
Olvasói kérdések
2013. október 18., 17:25 Jó napot. Már körülbelül egy éve viszketést érzek a végbélnyílás környékén. Egyik sem fájdalom. Mondja meg, kihez fordulhatok és mi lehet az? Kösz
Tegyen fel egy kérdéstMikrohelmintoszkópos kutatási módszerek
Immunológiai kutatási módszerek
A helmintiázisok diagnózisa bizonyos helminthák elleni specifikus antitestek kimutatásán alapul a vérszérumban. Az immunológiai kutatásokhoz az indirekt hemagglutináció, az enzim immunoassay, az immunelektroforézis, az immunabszorpció és a vérvizsgálatok egyéb szerológiai módszereit alkalmazzák.
Immunológiai kutatási módszereket alkalmaznak az alveococcosis, echinococcosis, cysticercosis, ascariasis, schistosomiasis és más helminthiasis diagnosztizálására.
Az epe és a nyombél tartalmának elemzése
Biopszia
Elektropunktúrás diagnosztika
Az elektropunktúrás diagnosztika a bőr ellenállásának elemzésén alapul, ha a gyengesége irritálja Áramütés. A helminthiasis gyanúja esetén az elektropunkciós diagnosztikát kétféleképpen lehet elvégezni: Voll-módszerrel vagy rezonanciavizsgálattal.
Instrumentális kutatási módszerek
Helminthiasis esetén is végrehajtják ultrahangos eljárás, FEDGS és számítógépes diagnosztika. Ezek a módszerek lehetővé teszik a helminták által okozott károsodás mértékének meghatározását, valamint az egyes szervek állapotának meghatározását.
A bélféreg töredékeinek kimutatásához a székletet meztelenül nézik, majd vízzel keverik, és kis részletekben Petri-csészében, sötét háttér előtt megvizsgálják. Minden gyanús részecskét helyeznek egy tárgylemezre egy csepp vízben, és nagyítóval megvizsgálják. A napi adagot 5-10-szeres mennyiségű víz hozzáadásával hengerbe helyezheti. Keverés után az edényt a szuszpendált részecskék teljes ülepedéig hagyjuk. A folyadék felületi rétegét lecsepegtetjük és öntjük tiszta víz. A kimosott csapadékot kis részletekben szabad szemmel vagy nagyítóval nézzük. A peték kimutatására mikroszkópos vizsgálati módszereket alkalmaznak.
Natív kenet módszer. A vizsgálati minta különböző helyeiről származó kis mennyiségű ürüléket egy tárgylemezen eldörzsöljük egy csepp 50%-os glicerinoldatban, izotóniás nátrium-klorid-oldatban vagy vízben. A keveréket fedőlemezzel fedjük le, és mikroszkóp alatt nézzük.
Fülleborn lebegő módszere. A széklet egy részét összekeverjük 20 rész telített nátrium-klorid-oldattal (fajsúly 1,18), amelyet kis részletekben adunk hozzá. A felszínre úszó nagy részecskéket azonnal eltávolítjuk, és a keveréket 45 percig állni hagyjuk. Ezalatt az idő alatt a nátrium-klorid-oldatnál kisebb fajsúlyú helmintpeték a felszínre úsznak. A felületi filmet körülbelül 1 cm átmérőjű huzalhurokkal eltávolítjuk, és egy tárgylemezre helyezzük mikroszkóp alatti vizsgálat céljából.
Kalantaryan módszer. A lebegő módszer hatékonyságát növeli, ha a nátrium-kloridot telített nátrium-nitrát-oldattal helyettesítjük. Ebben az esetben a keveréket 10-15 percig tartjuk.
A széklet nátrium-klorid- vagy nátrium-nitrát-oldattal való leülepedése után keletkezett felületi film tárgylemezzel is eltávolítható. Ebből a célból egy sóoldattal készült ürülékkeverékkel színültig megtöltött tégelyt üveglappal fedünk le úgy, hogy alsó felülete érintkezzen a folyadékkal. Az ülepedés után az üveget eltávolítják, és gyorsan felfelé fordítva a felületet, amelyen a film található, mikroszkóp alatt megnézzük.
Speriális redők kaparása (féregpeték és onkoszférák azonosítására) bika galandféreg) reggel, a vécékészítés előtt kell elvégezni. Vízbe vagy 50%-os glicerines oldatba mártott fa spatulával kaparják a végbélnyílást. A kapott anyagot egy csepp vízben vagy 50%-os glicerinoldatban egy tárgylemezre visszük, és mikroszkóp alatt megnézzük. A spatula cserélhető egy nedves vattakoronggal, amellyel a perianális területet töröljük át, majd alaposan öblítsük le vízzel. A vizet centrifugáljuk, és a csapadékot mikroszkóp alatt vizsgáljuk.
Bermann-módszer (lárvák kimutatására). Az állványba helyezett üvegtölcséren 5-6 g ürülékkel bevont fémhálót rögzítünk. A tölcsér alsó végére egy bilinccsel ellátott gumicsövet helyeznek. A tölcsért t ° 50 ° -ra melegített vízzel töltik meg úgy, hogy Alsó részürülékkel ellátott hálók érintkeztek vízzel. A lárvák aktívan beköltöznek a vízbe, és felhalmozódnak a gumicső alsó részében. 4 óra elteltével a folyadékot centrifugacsövekbe engedjük, centrifugáljuk, és a csapadékot mikroszkóp alatt megvizsgáljuk.
A köpet elemzése, az orrnyálka és hüvelyi folyás a tüdőtrematode paragonimus peték, az ascaridák és kampósférgek lárvái, a tűférgek tojásai, az echinococcus hólyag töredékei kimutatására. A vizsgált nyálkarészt (váladékot) üvegre kenjük, és fekete-fehér alapon makroszkopikusan, majd mikroszkóp alatt megnézzük. 25%-os antiformin oldatot adhatunk a vizsgált anyaghoz, alaposan felrázzuk, és 1-1,5 órán át tartjuk, hogy a nyálka feloldódjon. Az elegyet centrifugáljuk, és a csapadékot mikroszkóp alatt megvizsgáljuk.
Elemzése nyombél és gyomornedv májmételypeték, horogféreg, Strongyloides lárvák kimutatására. A kapott nyombéltartalom mindhárom részét centrifugáljuk, és az üledéket mikroszkóp alatt megvizsgáljuk. Szintén felfedezni és.
A szövetek tanulmányozása. A Trichinella lárvák azonosításához a biopsziás izomdarabokat óvatosan rostokra osztják, kompresszorüvegek közé szorítják (vastag üvegek csavarokkal), és mikroszkóp alatt, árnyékolt fénnyel megvizsgálják. A cysticerci azonosításához az izmokat boncolt tűkkel rétegezzük, az izolált hólyagot megtisztítjuk a környező szövettől, két tárgylemez közé szorítjuk és nagyítóval megvizsgáljuk.
Vérvizsgálat (a filariae lárváinak kimutatására). Egy lógó cseppet vazelinnel szegélyezett fedőlemezen vizsgálunk. 0,3 ml vért 3%-os oldat 10-szeresével keverhet össze. Az elegyet centrifugáljuk, és a csapadékot mikroszkóp alatt megvizsgáljuk. A készítmények 1 ml-re történő dúsításához vénás vér adjunk hozzá 3 ml 2%-os formalinoldatot vagy 5-szörös mennyiségű folyadékot, amely 95 ml 5%-os formalinoldatból, 5 ml ecetsavból és 2 ml tömény oldatból áll. alkoholos oldat hematoxilin. Az elegyet centrifugáljuk, a csapadékot desztillált vízzel mossuk és mikroszkóp alatt vizsgáljuk. A filaria különböző típusainak megkülönböztetésére a Giemsa-Romanovsky módszerrel festett keneteket vizsgáljuk.
Mód immunológiai diagnosztika. Használt (agglutináció, komplementkötés) és allergiás diagnosztikai tesztek(lásd) a megfelelő típusú helmintával.
Helmintológiai kutatási módszerek. Rizs. Helminth tojás. 1-10 - tojás orsóférgek(fonálférgek): 1 - 3 - orsóférgek (1 - megtermékenyített pete, 2 - megtermékenyített tojás fehérjeburok nélkül, 3 - megtermékenyítetlen tojás); 4 - macskaféle orsóféreg; 5 - orsóféreg húsevők; 5 - pinworms; 7 - ostorcsapás; 8 - tominx; 9 - horogféreg; 10 - tricho-strongylid. 11-15 - peték galandféreg (cestodes): 11 - szarvasmarha galandféreg; 12 - galandféreg törpe; 13 - patkány galandféreg; 14 - tök galandféreg; 15 - széles szalag. 16 - 24 - mételytojás (trematodes): 16 - trematodes (schistosomes) japán; 17 - trematodes (schistosomes) vizelet - szexuális; 18 - trematodes (schistosomes) Munson; 19 - trematodes (parogonymus) tüdő; 20 - trematodes (opisthorchis) szibériai (macska); 21 - trematodes (clonorchis) kínai; 22 - intestinalis trematodes (metagonimus); 23 - a máj trematodesa (fasciola); 24 - trematodes (dicrocelium) lándzsás.
A székletet kétféleképpen vizsgálják:
1. Makroszkópos - megtalálni a helmintákat, azok fejét, szegmenseit, strobilimaradványait. Az ürülék kis adagjait lapos fürdőben vagy Petri-csészében vízzel összekeverjük, és jó fényben, sötét háttér előtt, szükség esetén nagyítóval szemléljük. Minden gyanús képződményt csipesszel átviszünk egy másik csésze vízbe vagy egy tárgylemezre egy csepp hígított glicerinben.
A módszerrel fenntartva a vizsgált ürülékrészt üveghengerben vízzel felkeverjük, ülepítés után a felső vízréteget lecsepegtetjük. Ez többször megismétlődik. Amikor a folyadék átlátszóvá válik, lecsepegtetjük, és az üledéket Petri-csészében nézzük.
2. Mikroszkópos - a helminták tojásainak és lárváinak kimutatására. Számos kutatási módszer létezik.
egy). natív kenet - a legelterjedtebb és technikailag elérhető kutatási módszer. Minden féreg tojása és lárvája megtalálható. Kis számú tojás esetén azonban nem mindig találhatók meg. Ezért a dúsítási módszert alkalmazzák.
egy). Fülleborg módszer - ez egy dúsítási módszer, amely a helminthiasis tojások megjelenésén alapul telített NaCl-oldatban (1,2 - sűrűség; 400 g NaCl 1 liter vízben; 40% -os NaCl-oldat). A módszer hatékonyabb, mint a natív kenet. 2-5 g ürüléket üvegedényekbe helyezünk, NaCl-oldattal megtöltjük, megkeverjük, majd 45 perc múlva fémhurokkal eltávolítjuk a képződött filmet, egy csepp glicerint helyezünk egy tárgylemezre. Vizsgálja meg mikroszkóp alatt. A módszer hátránya a különböző helminták tojásainak késleltetett megjelenése, törpe galandféreg - 15-20 perc múlva, orsóféreg - 1,5 óra, ostorféreg - 2-3 óra.
2) Kalantaryan módszer - szintén dúsítási módszer, de telített NaNO 3 oldatot (1,38 sűrűségű) használnak. A tojások nagy része lebeg, az üledék vizsgálata nem szükséges. Hátránya, hogy a tojásokat sokáig oldatban tartják, ami azt eredményezi, hogy egyes tojások megduzzadnak és leülnek az aljára, eltűnnek a felületi filmből.
3. Gorjacsov módszere - petelerakódás elvén alapul, kis trematode peték kimutatása. Oldatként telített NaCl-oldatot használunk, és óvatosan 3-4 ml ürülékoldatot rétegzünk a tetejére. 15-20 óra elteltével a trematode tojások leülepednek az aljára. A folyadékot lecsepegtetjük, az üledéket egy tárgylemezen és mikroszkóp alatt helyezzük el.
4. Shulman csavaró módszer – helminth lárvák kimutatására a székletben. Csak frissen izolált székletet vizsgáljon. 2-3 g-ot egy üvegedénybe teszünk, és felöntjük 5-szörös mennyiségű vízzel, gyorsan felkavarjuk egy pálcikával, anélkül, hogy az edény falát érintené - 20-30 perc, majd gyorsan eltávolítjuk a rudat, és egy csepp végén lévő folyadékot egy tárgylemezre visszük és mikroszkóppal vizsgáljuk.
5. Berman-módszer - a helminth lárvák meleg felé vándorló képességén alapul, és a székletben való azonosításukra szolgál.
6. Harada és Mori módszere (lárvátenyésztési módszer), és ankylostomiasis vizsgálatára javasolt. A módszer azon alapul, hogy melegben és nedves szűrt papíron a kampósféreg tojásaiból filariform lárvák fejlődnek, amelyek könnyen kimutathatók. Egy szűrt papírcsík közepére 15 g ürüléket viszünk fel, az ürülékkel ellátott papírt tégelybe helyezzük úgy, hogy az alsó vége vízbe merüljön, a felső végét pedig parafával rögzítsük. Az edényt termosztátban 28 0 C-on 5-6 napig tartjuk. A filariform lárvák ezalatt fejlődnek ki, és leszállnak a vízbe. A folyadékot nagyítóval vizsgáljuk. Ha nehezen észlelhető, a folyadékot centrifugálják, miután a lárvákat 60 0-ra melegítve elpusztítják. A laboratóriumi technikusnak kesztyűt kell viselnie.
7. Az enterobiasis módszerei – pinworm peték és szarvasmarha-galandféreg azonosítása.
a) kaparás a perianalis redőkből - fából készült pálcikára erősen feltekercselt és 50%-os glicerinoldattal megnedvesített pamut törlővel. A laboratóriumban a tampont 1-2 csepp 50%-os vizes glicerinoldattal lemossák.
b) ragacsos atka módszer (Graham módszer)
A ragasztószalagot a perianális redőkre kell felhelyezni, majd ragadós réteggel a tárgylemezre és mikroszkóppal.
C) kaparás szempálcikákkal (Rabinovich módszere). A perianális kaparáshoz üveg szempálcákat használnak, amelyek legszélesebb részét speciális ragasztóval borítják, amely lehetővé teszi a gombatojások megtartását.
Vér, epe, köpet és izmok vizsgálata
Vérmikroszkópos vizsgálat - filariae lárvákat észlelnek.
Köpetvizsgálat - paraganim peték, orsóféreg lárvák, necator, strongyloid, echinococcus hólyag elemei.
Az izmok vizsgálata - trichinellózis gyanúja esetén megvizsgálják a beteg vagy a holttest izmait, valamint azt a húst, amely feltételezhetően okozta a fertőzést. A trichinoszkópia céljából az izmot apró darabokra vágják és kompresszorokba helyezik, ez két széles, vastag üveg, amely összezúzja az izmokat, és kapszulák formájában találják meg a Trichinella lárvákat - a kompressziós módszert.
Emésztési módszer - az izmokat mesterséges gyomornedvvel (sósavoldat és pepszin) öntik. Az izmok emészthetők, és a lárvák könnyen azonosíthatók. Az invázió intenzitásának meghatározása: a lárvák száma 200-ig 1 g izomszövetben - az invázió mérsékelt intenzitása; 500-ig - intenzív; 500 felett - szuperintenzív invázió.
Szerológiai módszerek
